【DiIDiODiD与DiR染料的区别与联系】在荧光染料的应用中,DiIDiODiD 和 DiR 是两种常用于细胞标记、示踪和成像的染料。它们在化学结构、荧光特性以及应用范围上存在一定的差异,但也有一些共通之处。以下是对两者区别与联系的总结。
一、基本介绍
DiIDiODiD(也称为DiI、DiODiD)是一种常用的脂溶性荧光染料,广泛应用于细胞膜标记、神经元追踪及组织切片成像。其激发波长约为549 nm,发射波长约为565 nm,属于橙红色荧光染料。
DiR(DiR-1, 1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate)同样是一种脂溶性荧光染料,常用于长期细胞跟踪和活体成像。其激发波长为647 nm,发射波长为660 nm,属于近红外荧光染料。
二、主要区别与联系
项目 | DiIDiODiD | DiR |
化学结构 | 含有多个偶氮基团,结构较复杂 | 含有吲哚菁结构,分子量较大 |
激发波长 (nm) | 549 | 647 |
发射波长 (nm) | 565 | 660 |
荧光颜色 | 橙红色 | 近红外(红光) |
穿透深度 | 较浅(适合薄层组织或细胞) | 更深(适合活体成像) |
细胞渗透性 | 易于进入细胞膜,标记快 | 渗透性略低,但更稳定 |
稳定性 | 相对稳定,但易光漂白 | 稳定性较好,抗光漂白能力更强 |
应用场景 | 细胞膜标记、神经元追踪、组织切片 | 长期细胞跟踪、活体成像、肿瘤研究 |
毒性 | 一般较低 | 通常较低,但需注意浓度控制 |
三、联系与共性
尽管 DiIDiODiD 和 DiR 在物理性质和应用上有所不同,但它们之间也有许多相似之处:
1. 脂溶性:两者均为脂溶性染料,能够通过细胞膜进入细胞内部。
2. 细胞标记用途:均可用于细胞膜的标记,适用于细胞追踪和示踪实验。
3. 荧光成像:均适用于荧光显微镜观察,可用于共聚焦成像等高级显微技术。
4. 生物相容性:在适当浓度下,两者对细胞的毒性较低,适合活细胞实验。
5. 可结合其他探针:两者均可与其他荧光标记物联合使用,实现多色成像。
四、总结
DiIDiODiD 与 DiR 虽然在激发/发射波长、荧光颜色、穿透深度等方面存在差异,但它们都是重要的脂溶性荧光染料,在细胞生物学、神经科学和生物成像等领域有着广泛应用。选择哪种染料,应根据实验目的、成像设备以及样本类型综合考虑。DiIDiODiD 更适合快速标记和浅层成像,而 DiR 则更适合需要长时间跟踪或深层组织成像的实验。